کیت آزمایشگاهی ارزان

مرکز فروش انواع کیت تحقیقاتی ارزان و اورجینال در تهران و سراسر ایران

کاربرد کیت آزمایشگاهی

این کیت های (kit) تشخیصی برای آزمایش نمونه های بدست آمده از بدن انسان (خون ، ادرار و بافت) استفاده می شوند تا اطلاعاتی را برای اهداف غربالگری، تشخیص یا نظارت بر درمان ارائه دهند ،یک وسیله پزشکی، یک وسیله پزشکی تشخیص آزمایشگاهی است اگر آن یک ماده معرف، کالیبراتور، مواد کنترل کننده، کیت، مخزن نمونه، نرم افزار، ابزار، دستگاه، تجهیزات یا سیستم باشد، چه به تنهایی و چه در ترکیب با سایر کالاهای تشخیصی برای مصارف آزمایشگاهی استفاده می شود.

تشخیص آزمایشگاهی

تشخیص آزمایشگاهی (IVD)، دستگاه های پزشکی یا کیت هایی (kit) هستند که برای اندازه گیری برخی پارامترها از یک نمونه به منظور ارائه اطلاعات پیش آگهی، تشخیص عفونت و درمان در مورد آن پارامتر استفاده می شوند. در واقع کیت ها برای تعیین وضعیت سلامتی در نظر گرفته شده اند، بنابراین به منظور تأیید بیماری و یا عدم بیماری کیت های تشخیصی آزمایشگاهی ضروری هستند. بیشتر کیت های تشخیصی برای ارزیابی بیوشیمیایی و بررسی کیفی آنتی ژن یا آنتی بادی در نظر گرفته شده اند.

کیت الایزا

به طورکلی کیت های الایزا، کمی لومینسانس، سرولوژی، بیوشیمی و رپید تست برای تشخیص وضعیت بیماری با توجه به سنجش محدوده غلظت مارکر موردنظر (متابولیکی، تیروئیدی، قلبی، تومور…) استفاده می شوند. ترانس آمینازها، فسفاتازها، نیتروژن اوره، LDH، آمیلاز، کلسیم، کلسترول، کدورت تیمول، فیبرینوژن، گلوکز، لیپاز، اسید اوریک و CPK ، بیش از 90٪ آزمایشگاه ها بطور روزمره از كیت (kit) استفاده می کنند.

واکنش زنجیره ای پلیمراز (PCR)، روشی است که برای ساخت نسخه های بی شماری از یک قطعه خاص از DNA به سرعت و با دقت انجام می شود،واکنش زنجیره ای پلیمراز محققان را قادر می سازد مقادیر زیادی دی ان ای را که برای آزمایش ها و مراحل مختلف در زیست شناسی مولکولی، تجزیه و تحلیل پزشکی قانونی، زیست شناسی تکاملی و تشخیص پزشکی لازم است بدست آورند.

کیت تحقیقاتی PCR در سال 1983 توسط بیوشیمیست آمریکایی و کری مالیس ساخته شد،وی در سال 1993 به دلیل کارهای پیشگامانه جایزه نوبل شیمی را به دست آورد و قبل از توسعه روش PCR ، روش های بکار رفته در تولید نسخه هایی از قطعات دی ان ای نوترکیب وقت گیر و پر کار بودند اما امروزه ماشینی که برای انجام واکنش های پی سی ار طراحی شده است، می تواند تنها در طی چند ساعت میلیاردها نسخه DNA را از یک قطعه دی ان ای تولید کند.

مرحله PCR روشی رایج است که در آزمایشگاه های تحقیقات پزشکی و بیولوژیکی مورد استفاده قرار می گیرد در مراحل اولیه پردازش DNA برای تعیین توالی استفاده می شود همچنین برای شناسایی وجود یا عدم وجود یک ژن، برای شناسایی عوامل بیماری زا در هنگام عفونت و تولید نمودار های DNA پزشکی قانونی از نمونه های ریز دی ان ای کمک می گیرند.

کیت آزمایشگاهی الایزا یا همان الایزا کیت

کیت الایزا دارای ماده هایی هستند، که برای انجام دادن تست الیزا توسط محققان یا کارشناسان آزمایشگاه های تشخیصی و تحقیقاتی استفاده می شود،پایه و اساس بر موجودیت آنتی ژن و آنتی بادی در نمونه می باشد ،در حالت کلی این تست برای ردیابی آنتی ژن یا آنتی بادی به کار می رود به این صورت که یکی از این 2 ماده در بستر جامد ثابت می شود و برای رد یابی دومی مورد استفاده قرار می گیرد .

کیت ازمایشگاهی elisa

تست الایزا یک آزمایش ایمونووژیکی استاندارد و نسبتا دقیقی می باشد روش های الایزا به روش مستقیم و غیر مستقیم تقسیم می شود در روش مستقیم آنتی ژن یا آنتی بادی مورد نظر به طور مستقیم بر فاز جامد پوشش داده می شود سپس آنتی بادی یا آنتی ژن مکمل و نشاندار شده ان به سیستم اضافه می شود در روش غیر مستقیم سرم رقیق شده به آنتی ژن های پوشش داده شده در فاز جامد اضافه می شود و با آنالیز سیگنال به وجود آمده می توان به وجود آنتی ژن یا آنتی بادی مورد نظر دسترسی پیدا کرد.در روش رقابتی الایزا دو آنتی ژن یا دو آنتی بادی برای اتصال به لیگاند رقابت می کنند.تست الایزا به روش ساندویچ در واقع می توان گفت عمومی ترین تست الایزا می باشد که درآن یک انتی ژن در بین دو انتی بادی اختصاصی قرار می گیرد.

کیت استخراج DNA

DNA ماده وراثتی موجود در هسته سلول و دو رشته ای می باشد که از اتصال میلیون ها جفت نوکلوتید به همدیگر ساخته شده اند ،همه سلول های هسته دار DNA دارند، در بافت هایی مثل خون فقط گلبول های سفید دارند گلبول های قرمز و پلاکت ها که فاقد هسته هستند DNA ندارند، پایه تمام تحقیقات بیو تکنولوژی دستکاری DNA و آنالیز ان است ، کیت های استخراج DNA با توجه به نمونه ای که از آن می شود استخراج را انجام داد مثل باکتری ،بافت ،خون ، سرم، پلاسما و… همچنین روش استخراج و تعداد استخراج دارای کدهای مختلف در برندهای مختلف هستند،برای استفاده از کیت خریداری شده باید مراحل اصلی پروتکل کیت مربوطه مطالعه شود.

معرفی دستگاه PCR و ترموسایکلر به عنوان اساس کار این دستگاه:

روش PCR اتفاقی است که در سلول می افتد را در شرایط کنترل شده در آزمایشگاه شبیه سازی می کند. یعنی وقتی DNA قبل از تقسیم سلولی کپی (تکثیر) می شود ، ماشینی که استفاده می شود به سادگی یک دستگاه PCR یا یک ترموسیکلر نامیده می شود ،لوله های آزمایشگاهی حاوی مخلوط مورد علاقه دی ان ای در دستگاه قرار داده می شوند و دستگاه دما را متناسب با هر مرحله از روند تغییر می دهد.

مواد استاندارد موجود در مخلوط عبارتند از:

الگوی دی ان ای

پرایمرهای خاص

آنزیم DNA پلیمراز مقاوم در برابر حرارت

چهار نوع مختلف نوکلئوتیدهای

نمک های مورد نیاز (بافر) برای ایجاد یک محیط مناسب برای عملکرد آنزیم

روند PCR چگونه است؟

روش PCR شامل فرایندی از گرمایش و سرمایش با عنوان چرخه حرارتی است که توسط دستگاه انجام می شود و در واقع یک فرآیند سه مرحله ای است که در چرخه های مکرر اجرا می گردد.

در روند روش PCR سه مرحله اصلی وجود دارد که عبارتند از :

مرحله Denaturing : هنگامی که دو رشته DNA الگو گرم می شود تا پیوندهای هیدروژن بین رشته های مارپیچ DNA را شکسته و دو رشته منفرد ایجاد کند. این کار در دمای حدود 95 درجه سانتیگراد (203 درجه فارنهایت) انجام می شود.

مرحله Annealing : هنگامی که دما کم می شود تا پرایمرهای دی ان ای بتوانند به هردو رشته DNA الگوی متصل شوند و پلیمریزاسیون آغاز شود. در این مرحله دما تا حدود 55 درجه سانتیگراد (131 درجه فارنهایت) کاهش می یابد.

مرحله Extending : هنگامی که دما افزایش می یابد و رشته جدید DNA توسط آنزیم پلیمراز Taq ساخته میشود،آنزیمی که در اصل از یک باکتری ترموفیلیک به نام Thermus aquaticus جدا شده است ،ترتیب اضافه شدن نوکلئوتیدهای آزاد توسط توالی نوکلئوتیدها در رشته اصلی دی ان ای (الگو) مشخص می شود. درجه حرارت در این مرحله تا حدود 72 درجه سانتیگراد (162 درجه فارنهایت) افزایش می یابد و در پایان چرخه که حدوداً پنج دقیقه به طول می انجامد،درجه حرارت بالا می رود و روند کار دوباره آغاز می شود.

تعداد نسخه ها بعد از هر چرخه دو برابر می شود و معمولاً 25 تا 30 سیکل مقدار کافی DNA را تولید می کند.و واکنش PCR كامل در چند ساعت و يا حتي كمتر از يك ساعت با دستگاه هاي پر سرعت انجام مي شود،پس از اتمام PCR، روشی به نام الکتروفورز می تواند برای بررسی کمیت و اندازه قطعات دی ان ای تولید شده، استفاده شود، روش های جدید PCR شامل real-time PCR یا qPCRو dPCR می باشد،در qPCR، تکثیر DNA در زمان واقعی کنترل می شود و اجازه می دهد کمی از DNA هدف در طی فرایند استفاده شود.

روش dPCR یک رویکرد جدید و تصفیه شده تر است که روند PCR را در مراحل بسیار کوچک تر شکسته است این افزایش دقت، اندازه گیری های قابل اطمینان تر و اندازه گیری مطلق از نمونه های بسیار کوچک یا مخلوط را ارائه می دهد و فناوری PCR هنوز در حال توسعه است ادامه روند توسعه و بهسازی فرایندها و ابزارهای مورد استفاده اجازه می دهد تا این فرآیند برای رفع نیازهای تخصصی تطبیق یابد.

مرکز فروش کیت آزمایشگاهی ارزان در ایران با همکاری سفیر آزما کیان

کیت استخراج RNA

کیت استخراج RNA بر اساس اینکه از چه نمونه ای می توان استخراج را انجام داد مثل سلول،افت،مخمر، گیاهان و… و همچنین روش های استخراج و تعداد استخراج دارای کد های مختلف در برند های مختلف هستند.<br /> برای استفاده از کیت خریداری شده باید مراحل اصلی پروتکل کیت مربوطه مطالعه شود . متداول ترین روش استخراج RNA استخراج بوسیله تیرازول و RNeasy می باشد.

استخراج RNA

لیز سلول را می توان با استفاده از بافرها یا معرف های مانند ایزوتیوسیانات گوانیدینیوم ، کلرید گوانیدینیوم ، سدیم ددسیل سولفات سدیم (SDS) ، فنل یا کلروفرم و… بدست آورد. TRIzol یا RNAlater می تواند برای حفظ یکپارچگی RNA در حین لیز استفاده شود.

دناتوراسیون DNA

دناتوراسیون DNA بوسیله DNase مورد استفاده قرار می گیرد ، در حالی که می توان پروتئیناز K را به هضم پروتئین ها اضافه کرد. از طرف دیگر ، استخراج ارگانیک مکرر با استفاده از فنل و کلروفرم یا حل کردن نمونه در بافرهای حاوی نمک گوانیدینیوم نیز می تواند برای از بین بردن پروتئین ها استفاده شود.